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更新時間：2021-01-11 
瀏覽次數(shù)：1822凍干質(zhì)控菌種培養(yǎng)條件和保存方法
微生物檢測凍干質(zhì)控菌種白色念珠菌標(biāo)準(zhǔn)菌株使用說明書
1 復(fù)蘇菌種前應(yīng)準(zhǔn)備適于該菌種生長的固體、液體培養(yǎng)基和培養(yǎng)設(shè)備，所有操作均應(yīng)在符合生物安全保護及無菌條件下進行。
2 啟開菌種前，用75%酒精棉消毒西林瓶表面。在無菌條件下，按鋁蓋上的箭頭方向打開塑蓋，撕開鋁蓋，打開西林瓶膠塞，加入0.3mL左右的配套液體培養(yǎng)基，用無菌滴管反復(fù)吹吸，將凍干菌種溶解成為懸液，然后用無菌滴管或接種環(huán)移至斜面、平板或液體培養(yǎng)基，并連同剩余菌懸液的西林瓶一起放置于36℃培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。(菌種與培養(yǎng)和保存方法對應(yīng)表見附表1，培養(yǎng)基、培養(yǎng)方法和傳代保存方法見附表2)。
3 次日觀察菌種的生長情況，如未生長，應(yīng)繼續(xù)培養(yǎng)24h，或吸取培養(yǎng)之后的菌懸液中再次接種培養(yǎng)基，培養(yǎng)24h觀察。
4 菌株為一次性使用品，開啟之后不能反復(fù)使用或保存，暫不開啟的菌種應(yīng)在4℃保藏。
5 復(fù)蘇后的菌種在傳1-2代后使用，建議菌種使用5代后棄用。
注)：購買后請盡量及時使用凍干菌種，如發(fā)現(xiàn)菌種不活或污染等情況，請在購買之日起1個月內(nèi)與我們。
凍干菌種白色念珠菌標(biāo)準(zhǔn)菌株復(fù)蘇示意圖：
培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件和保存方法
方法1：
無菌條件下，用無菌吸管往西林瓶凍干菌粉中加入腦心浸液培養(yǎng)基，充分懸浮后取適量的菌懸液于營養(yǎng)瓊脂(022020)斜面上35-37℃劃線培養(yǎng)24-48h。斜面(*代)放于4℃冰箱保存，每個月轉(zhuǎn)接一次，代數(shù)以此類推，建議使用菌種代數(shù)不超過5代，5代后菌種應(yīng)銷毀。
方法2：
無菌條件下，用無菌吸管往西林瓶凍干菌粉中加入腦心浸液培養(yǎng)基，充分懸浮后取適量的菌懸液于營養(yǎng)瓊脂(022020)斜面上劃線35-37℃培養(yǎng)24-48h。斜面(*代)放于25℃下保存，每個月轉(zhuǎn)接一次，代數(shù)以此類推，建議使用菌種代數(shù)不超過5代，5代后菌種應(yīng)銷毀。
方法3：
無菌條件下，用無菌吸管往西林瓶凍干菌粉中加入腦心浸液培養(yǎng)基，充分懸浮后取適量的菌懸液于血平板(024070)后涂布，35-37℃培養(yǎng)24-48h。平板(*代)放于4℃冰箱保存，并用封口膜或其它封條密封平板，每半個月轉(zhuǎn)接一次，代數(shù)以此類推，建議使用菌種代數(shù)不超過5代，5代后菌種應(yīng)銷毀。
方法4：
無菌條件下，用無菌吸管往西林瓶凍干菌粉中加入腦心浸液培養(yǎng)基，充分懸浮后取適量的菌懸液于胰蛋白胨大豆酵母浸膏瓊脂(TSA-YE)(026020)斜面上 35-37℃培養(yǎng)24-48h。斜面(*代)放于4℃冰箱保存，每個月轉(zhuǎn)接一次，代數(shù)以此類推，建議使用菌種代數(shù)不超過5代，5代后菌種應(yīng)銷毀。
方法5：
無菌條件下，用無菌吸管往西林瓶凍干菌粉中加入腦心浸液培養(yǎng)基，充分懸浮后取適量的菌懸液于皰肉牛肉粒肉湯(027140)加液體石蠟1cm,35-37℃培養(yǎng)48-72h。肉湯(*代)放于4℃冰箱環(huán)境下保存，每半個月轉(zhuǎn)接一次，代數(shù)以此類推，建議使用菌種代數(shù)不超過5代，5代后菌種應(yīng)銷毀。
方法6：
無菌條件下，用無菌吸管往西林瓶凍干菌粉中加入堿性蛋白胨水，充分懸浮后取適量的菌懸液于堿性瓊脂(025040)斜面上35-37℃培養(yǎng)24-48h。斜面(*代)放于25℃下保存，每個月轉(zhuǎn)接一次，代數(shù)以此類推，建議使用菌種代數(shù)不超過5代，5代后菌種應(yīng)銷毀。
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